一、仪器主要参数
流式细胞仪型号：艾森NovoCyte 2040R，双激光（488nm，640nm）, 488nm激光器配置3个检测通道：FITC(530nm/30)、PE (572nm/28)、PerCp (675nm/30)；640nm激光器配置1个检测通道：APC(675nm/30)。仪器最大样品流速：120μL/min。
二、主要应用：
用于定性、定量分析细胞膜、细胞质和细胞核中的各种细胞成分；细胞的各种功能状态，如增殖、凋亡、分化、酶活性、细胞膜通透性、氧化还原状态、吞噬性等：
1、细胞表面标志检测：细胞免疫表型分析、表面蛋白分析等。
2、细胞内蛋白检测：细胞因子、细胞骨架分子和胞质酶类等
3、细胞内离子浓度检测：H+、Na+、K+、Ca2+等。
4、细胞核成分检测：细胞周期、DNA总量分析等。
5、细胞膜：流动性、膜电位、膜通透性等。
6、细胞功能：如细胞死活判定、pH值、增殖与凋亡、抗药性等。
7、基因表达：内源及外源基因表达，荧光报告基因的表达和转染效率判定。
三、样本制备
1、待测样品必须为单细胞悬液，测试前经筛网或细胞滤膜过滤。
2、保持样品细胞活力，尤其细胞表达蛋白（包括细胞内和细胞表面）分析，必须为新鲜制备的活细胞。
3、正确设立对照，包括阳性对照、阴性对照等。
四、使用流程
1、开机
轻按电源键启动仪器，电脑上打开NovoExpressTM，待仪器初始化完成，待软件状态栏显示“就绪”。
2、新建实验
①点击主菜单“文件”→“新建”新建实验”；
②可用以下多种方式新建实验样本或标本：
▲选择“实验管理”，右键点击“实验文件名.ncf”，在本实验文件下新建标本。右键点击“标本”，在选中的标本下新建样本。
▲如已有模板文件，点击主菜单“文件”→“新建”→“从模板新建”，将新建有相同模板的标本或样本。
▲点击主菜单“文件”→“保存”。
3、样品采集
①在“实验管理”面板，双击样本，使之成为当前样本；
②设置采集条件：样本使用参数、停止条件、流速；
③将样本管充分混匀，置于样本架。
④点击“采集”按钮。此时样本针会向下运动至样本管内，吸取一定体积的样本后收回。注意：样本管须放正，避免打针！
4、数据分析
①画图：根据需要选择图标做图，进行荧光通道参数选择与修改，图片缩放；
②设门：根据需要选择门类型，双击门的标签可以对门进行重命名；
③导出/导入模板
▲在“实验管理”面板右键点击标本或样本名称，选择“导出”→“做为模板导出”或者“导入”→“导入模板”
▲在标本或样本名称上按住鼠标左键，拖动到另一个标本或样本名称，可直接实现模板应用。
④导出/导入FCS文件：
▲在“实验管理”面板右键点击实验文件名称、标本或样本，选择“导出FCS文件”。
▲导入FSC文件：在“实验管理”面板右键点击实验文件名称、标本或样本，选择“导入FCS文件”。
5、关机
平衡废液，待电源键为绿色，即可轻按仪器前面板上的电源按钮，仪器将自动执行关机清洗流程。关机流程结束后，电源自动切断，指示灯熄灭，及时关闭电脑。
注意事项：
1、实验操作前须检查鞘液、废液、冲洗液和清洗液的水位；
2、样品上机前，须提前过滤处理单细胞悬液（常用滤网：40μm、70μm、100μm）；
3、样品管位置摆放正确，避免样本针被打弯，推荐使用5 mL流式管上样；
4、拷贝数据，需提前将U盘格式化后再使用。
5、若仪器出现任何故障，及时联系工作人员。
