一、主要技术参数：

Nanodrop 2000c可以通过基座检测0.5-2 ul的样本，也可以使用传统的比色皿来进行样本检测。

1）基座模式：光源为氙闪烁灯，波长范围：190-840 nm，波长准确性: ±1 nm；光谱分辨率≤1.8 nm，吸光值范围：0.02-300（等同于10 mm光程时）；检测极限：2 ng/ul dsDNA，最大检测浓度：15,000 ng/ul（dsDNA）。

2）比色皿模式：光束高度8.5mm，光程：10，5，2，1 mm；检测极限：0.4 ng/ul dsDNA，大检测浓度：750 ng/ul（dsDNA）。

二、主要应用：

1、Nucleic Acid检测

吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值（换算成10mm光径吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度检测。

2、UV-Vis检测

190-840nm间所有波长的吸收值及光谱。

3、A280蛋白质定量法

280nm吸收值（换算成10mm光径吸收值）、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质，须具有已知的质量消光系数（mass extinction coefficient）方可计算。

4、BCA、Bradford及Lowry检测

依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果，自动画出标准曲线并计算R square，待测蛋白质浓度。

*蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂，因呈色剂随时间会逐渐加深，使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品，在合适时间内完成检测，以得到良好的标准曲线。每个标准曲线最多可有七个标准品，每个标准品最多可做五重复。

*测蛋白质时样品体积需使用2ul，每个样品检测后需以Kimwipes低尘擦拭纸擦拭15-20回，以避免呈色剂与蛋白质的残留。

三、使用流程（Nucleic Acid检测为例）

1、双击桌面软件图标打开软件（图1）。

2、选择检测功能，如Nucleic Acid、Protein A280、UV-Vis等（图2）。

3、对检测样本进行命名，然后选择对应样品测试类型，可点击下拉小箭头选择测试类型，包含：DNA、RNA、ssDNA、Oligo DNA、Oligo RNA。（图3）

4、仪器校零，抬起仪器上臂，加样品的缓冲液1 ul或2 ul到仪器的下基座上，如下图所示（图4）。

5、加样完毕后，放下仪器上臂：点击软件左上角的Blank图标。大约5秒后，Measure按键由灰色变亮后，才可以抬起上臂，用无尘纸把上下基座擦拭干净，如图5所示。若需重新校零，可点击左上角的Re-Blank图标重复步骤5。

6、擦拭完毕，用移液器吸取与缓冲液等量的样品并把样品加到仪器的基座上，并且点击Measure按键进行检测。

7、每完成一次样品检测后，需用无尘纸清洁上下基座。样本全部检测完毕后，用移液器吸取蒸馏水约2-5 ul到仪器的下基座上，放下仪器上臂，等待几秒，抬起仪器上臂，用无尘纸把上下基座擦拭干净之后再将仪器上臂放下，回到初始状态。

8、数据保存：点击Report，选择需保存的检测数据，保存为excel格式，用光盘刻录数据。

注意事项：

1、样本检测量参考：核酸水溶液：1 ul，纯蛋白：2 ul，Bradford，BCA，Lowry或者蛋白Pierce 660nm试验：2 ul，微生物细胞悬浮液：2uL。

2、最好使用精确的移液器（0-2 ul）和tip头来取样来保证取样的准确。如果对样本的特征或者移液器精确性不太确认，最好使用2 ul样本来做检测。

3、对于所有模式检测（包括比色皿检测），检测臂都必须放下。

4、同一滴液体只能做一次侦测，欲重复定量同一样品，请擦掉前一滴，重新取出一滴进行检测。

5、数据只能用实验室公用U盘进行拷贝。

6、及时做好使用记录登记。